微管精確切割

時間:2017-11-30

2.Chaofeng Wang, et al: KTN80 confers precision to microtubule severing by specific targeting of katanin complexes in plant cells.The EMBO  journal. 2017 oct.DOI:10.15252. IF=9.7

【研究內容】微管作為一種高度動態的細胞骨架,在細胞周期運行、細胞分裂、細胞形態維持、細胞遷移等方面起至關重要的作用,但微管功能的行使需要進行精確切割,Katanin作為一類可以切割微管的微管相關蛋白,保守存在于動物和植物之間。由兩個亞基成,P60/KTN1P80/KTN80。但活細胞中研究Katanin復合體對微管切割的精細調控機制尚未取得良好進展,且Katanin亞基p60/p80復合體的具體組成及結構也不十分清楚。本研究通過構建了CRISPR/Cas9基因敲除載體并指導了后代轉化子的篩選鑒定,發現Katanin亞基缺失帶來擬南芥生長發育異常,這種發育異常是由微管的排列方式發生紊亂,微管切割能力缺陷所導致的。通過雙分子熒光互補以及體外IP相互作用產物質譜鑒定證明擬南芥中p80亞基KTN80p60亞基KTN1呈異源二聚體形式存在于細胞質中,當發生微管切割作用時KTN80具有精確制導作用,可將KTN1-KTN80異源二聚體導向至微管切割位點,而p60亞基KTN1介導KTN1-KTN80異源二聚體的六聚體化,最終形成十二聚體的環狀超復合體,并識別特異的微管構象、完成切割,p60亞基執行切割功能。該研究首次在活細胞水平揭示了微管的精準切割機制,也為精確操控微管切割提供了新的思路及藥物設計新靶標。

服務內容:LC/MS混合蛋白樣品鑒定

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