产品简介

外泌体在分泌细胞和受体细胞间的穿梭介导了细胞间的生物分子传递,是不同组织细胞间信息沟通的重要媒介,外泌体通过携带来自分泌细胞的多种RNA,蛋白和脂成分,参与广谱的生理和病理过程,包括炎症反应、肿瘤转移、心血管疾病等。

外泌体中蛋白质是参与疾病发生、发展的重要部分。经质谱鉴定发现不同来源外泌体携带了4400余种特异性蛋白质。而蛋白质差异表达是区分不同来源外泌体的重要特点也是研究外泌体的重要途径。但是,随着蛋白质组学技术的快速更新,外泌体特异蛋白质的研究将具有巨大的前景。

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项目流程

以血液样本为例:



样本要求

细胞样本

细胞样本的培养基使用量取决于细胞系以及培养状况,细胞系不同外泌体的释放量有很大差别,外泌体释放量高的细胞系几毫升培养液就足够;释放量低的则需要上百毫升。一般来说一个普通的细胞系,用超离分离外泌体,预实验(摸索条件)起始培液量最好50ml以上(直接正式实验建议100-500ml)。细胞培养过程中可以使用无外泌体血清培养基培养,也可以使用含有外泌体的血清培养细胞到一定密度(70-80%),然后吸去培养液,PBS洗数次之后换无血清培液进行培养(建议无血清培养48h后收集细胞上清)。

血液样本

目前认为血清中外泌体的含量还是很高的,用促凝管或者抗凝管收集全血3000rpm 4℃ 离心10min,取上清,液氮速冻,保存于-80℃,一般需要3-5ml的血浆/血清样本。

实验周期

样本质检合格后,4-6周。



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